激光共聚焦顯微鏡測試樣品的要求可以細分為生物樣品和材料樣品兩大類,具體要求如下:
生物樣品
熒光表達觀察:
樣品應(yīng)先在熒光顯微鏡下觀察熒光表達是否正常,以確定是否有必要使用激光共聚焦顯微鏡進行進一步分析。
蓋玻片厚度:
蓋玻片的厚度要求≤0.17mm,以確保測試的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
激發(fā)波長和發(fā)射波長:
需要明確樣品的激發(fā)波長和發(fā)射波長,這是進行激光共聚焦顯微鏡測試的關(guān)鍵參數(shù)。
掃描區(qū)域設(shè)置:
如果需要進行重構(gòu),需要明確掃描區(qū)域的大小、位置和Z步進,這些參數(shù)會直接影響測試時間和結(jié)果的精度。
樣品固定:
樣品B須貼壁良好,不能懸浮起來。在載玻片上固定好樣品后,再送樣測試。
抗熒光淬滅劑:
進行顯微成像時,樣品需要加抗熒光淬滅劑,并且蓋玻片需要固定,以減少熒光信號的損失。
材料樣品
樣品制備:
材料樣品需要提前制備好,以滿足測試需求。
尺寸與平整度:
樣品尺寸沒有具體要求,但樣品B須平整,以確保測試的準(zhǔn)確性和圖像質(zhì)量。
成像范圍:
拍出來的圖像*大面積在1.11x1.8mm到5x5mm范圍內(nèi),顏色可調(diào),以滿足不同的測試需求。
其他注意事項
熒光染料選擇:如果同一樣品中有多種熒光染料,應(yīng)盡可能避免它們的發(fā)射波長重疊,以防止交叉顏色問題。
觀察模式:激光共聚焦顯微鏡通常配備多種觀察模式,應(yīng)根據(jù)實驗需求選擇合適的觀察模式。
操作環(huán)境:在操作過程中,應(yīng)保持顯微鏡和樣品的清潔,避免灰塵和雜質(zhì)對測試結(jié)果的影響。
綜上所述,激光共聚焦顯微鏡測試樣品的要求涉及樣品的準(zhǔn)備、固定、激發(fā)與發(fā)射波長的選擇、掃描區(qū)域的設(shè)置以及操作環(huán)境等多個方面。只有嚴格按照這些要求進行操作,才能獲得準(zhǔn)確、可靠的測試結(jié)果。