微生物的解釋：

個(gè)體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統(tǒng)稱。 微生物包括細(xì)菌、病毒、真菌、和少數(shù)藻類(lèi)等。（但有些微生物是肉眼可以看見(jiàn)的，像屬于真菌的蘑菇、靈芝等。）病毒是一類(lèi)由核酸和蛋白質(zhì)等少數(shù)幾種成分組成的“非細(xì)胞生物”，但是它的生存必須依賴于活細(xì)胞。根據(jù)存在的不同環(huán)境分為原核微生物、空間微生物、真菌微生物、酵母微生物、海洋微生物等。

微生物的作用和害處：

微生物對(duì)人類(lèi)zui重要的影響之一是導(dǎo)致傳染病的流行。在人類(lèi)疾病中有50%是由病毒引起。微生物導(dǎo)致人類(lèi)疾病的歷史，也就是人類(lèi)與之不斷斗爭(zhēng)的歷史。在疾病的預(yù)防和治療方面，人類(lèi)取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展，但是新現(xiàn)和再現(xiàn)的微生物感染還是不斷發(fā)生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治療藥物。一些疾病的致病機(jī)制并不清楚。大量的廣譜抗生素的濫用造成了強(qiáng)大的選擇壓力，使許多菌株發(fā)生變異，導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生，人類(lèi)健康受到新的威脅。一些分節(jié)段的病毒之間可以通過(guò)重組或重配發(fā)生變異，zui典型的例子就是流行性感冒病毒。

知道了微生物的具體定以后，實(shí)驗(yàn)人員在對(duì)微生物進(jìn)行研究時(shí)應(yīng)該采用什么類(lèi)型的顯微鏡才能看到，用什么顯微鏡能看到更好，對(duì)常見(jiàn)的微生物形態(tài)進(jìn)行觀察和分析。

顯微鏡的發(fā)明是為了能看到人肉眼所不能看到的微笑物品，微生物的體積非常小，那么必須借助顯微鏡對(duì)其進(jìn)行放大觀察，加上微生物種類(lèi)甚多，所以基本大部分的光學(xué)顯微鏡都能對(duì)微生物進(jìn)行觀察，接下來(lái)的問(wèn)題是，什么樣的微生物應(yīng)該用什么類(lèi)型顯微鏡來(lái)進(jìn)行觀察和分析，常見(jiàn)的可做微生物形態(tài)觀察的顯微鏡有生物顯微鏡，相差顯微鏡，倒置顯微鏡，熒光顯微鏡，共焦顯微鏡等等。

下面介紹各種不同的顯微鏡對(duì)微生物進(jìn)行觀察：

  1．普通光學(xué)顯微鏡　　采用自然光或燈光為光源，其波長(zhǎng)約為0.4μm。顯微鏡的分辨率為波長(zhǎng)的二分之一，即0.2μm，而肉眼可見(jiàn)的zui小形象為0.2mm。故用油（浸）鏡放大1000倍，能將0.2μm的微粒放大成肉眼可見(jiàn)的0.2mm。普通光學(xué)顯微鏡可用于細(xì)菌、放線菌和真菌等的觀察。

      2．暗視野顯微鏡常用于觀察不染色微生物形態(tài)和運(yùn)動(dòng)。在普通顯微鏡安裝暗視野聚光器后，光線不能從中間直接透入，視野呈暗色，當(dāng)標(biāo)本接受從聚光器邊緣斜射光后可發(fā)生散射，因此可在暗視野背景下觀察到光亮的微生物如細(xì)菌或螺旋體等。 

      3．相差顯微鏡相差顯微鏡利用相差板的光珊作用，改變直射光的光位相和振幅，將光相的差異轉(zhuǎn)換為光強(qiáng)度差。在相差顯微鏡下，當(dāng)光線透過(guò)不染色標(biāo)本時(shí)，由于標(biāo)本不同部位的密度不一致而引起光相的差異，可觀察到微生物形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和運(yùn)動(dòng)方式等。

      4．熒光顯微鏡熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡基本相同，主要區(qū)別在于光源、濾光片和聚光器。目前大多數(shù)使用的是落射光裝置，常用高壓汞燈作為光源，可發(fā)出紫外光或藍(lán)紫光。濾光片有激發(fā)濾光片和吸收濾光片二種。用藍(lán)光的熒光顯微鏡除可用一般明視野聚光器外，也可用暗視野聚光器，以加強(qiáng)熒光與背景的對(duì)比。本法適用于對(duì)熒光色素染色或與熒光抗體結(jié)合的細(xì)菌的檢測(cè)或鑒定。

      5．電子顯微鏡用電子流作為光源，波長(zhǎng)與可見(jiàn)光相比差幾萬(wàn)倍，大大提高了分辨力，并用磁性電圈作為光學(xué)放大系統(tǒng)，放大倍數(shù)可達(dá)數(shù)萬(wàn)倍或幾十萬(wàn)倍，常用于病毒顆粒和細(xì)菌超微結(jié)構(gòu)的觀察。 

對(duì)未染色的微生物標(biāo)本進(jìn)行觀察：

不染色標(biāo)本一般可用于觀察細(xì)菌形態(tài)、動(dòng)力及運(yùn)動(dòng)情況。細(xì)菌未染色時(shí)無(wú)色透明，在顯微鏡下主要靠細(xì)菌的折光率與周?chē)h(huán)境的不同來(lái)進(jìn)行觀察。有鞭毛的細(xì)菌運(yùn)動(dòng)活潑，無(wú)鞭毛的細(xì)菌則呈不規(guī)則布朗運(yùn)動(dòng)。梅毒蒼白密螺旋體、鉤端螺旋體、彎曲桿菌等的活菌各有特征鮮明的形態(tài)和運(yùn)動(dòng)方式，具有診斷意義。常用的方法有壓滴法、懸滴法和毛細(xì)管法等。
      1．懸滴法在潔凈凹玻片的凹孔四周涂上凡士林，用接種環(huán)取一環(huán)菌懸液放在蓋玻片中央，再將凹玻片的凹孔對(duì)準(zhǔn)蓋玻片中央的液滴并蓋上，然后迅速翻轉(zhuǎn)，輕壓蓋玻片，使其與凹孔邊緣的凡士林粘緊封閉后置高倍鏡下（或暗視野）觀察。
      2．壓滴法用接種環(huán)取一環(huán)菌懸液置于潔凈玻片的中央，在菌懸液上輕輕蓋上一蓋玻片，注意避免產(chǎn)生氣泡并防止菌懸液外溢，靜止數(shù)秒鐘后置高倍鏡下明視野（或暗視野）觀察。
      3．毛細(xì)管法主要用于厭養(yǎng)菌動(dòng)力的檢查。通常選用60~70mm長(zhǎng)。0.5~1.0mm孔徑的毛細(xì)管虹吸厭養(yǎng)菌懸液后，用火焰將毛細(xì)管兩端熔封。并用塑膠紙將毛細(xì)管固定在載玻片上，置高倍鏡下暗視野觀察。 

用顯微鏡對(duì)染色微生物標(biāo)本進(jìn)行觀察：

細(xì)菌標(biāo)本經(jīng)染色后，由于細(xì)菌與周?chē)h(huán)境間在顏色上形成鮮明對(duì)比，故在普通光學(xué)顯微鏡下可清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)特征（如細(xì)菌的大小、形狀、排列等）和某些特殊結(jié)構(gòu)（如莢膜、鞭毛、芽孢等），并可根據(jù)染色反應(yīng)性對(duì)細(xì)菌加以分類(lèi)鑒定。
  （一）細(xì)菌染色的一般程序細(xì)菌染色的一般程序是：涂片（干燥）—固定—染色。
      1．涂片制備血液、分泌物、排泄物、穿刺液和液體培養(yǎng)物，直接在載玻片上作薄膜涂片；尸檢或感染動(dòng)物組織，病變局部涂抹采樣的棉拭子直接涂片。固體培養(yǎng)基上的菌落或菌苔的制片，先用接種環(huán)取一環(huán)生理鹽水置載玻片中央，再用無(wú)菌接種環(huán)取少量的培養(yǎng)物在生理鹽水中磨勻，涂布成1cm2大小的涂面，置室溫下自然干燥或遠(yuǎn)火慢慢烘干。
      2．固定目的是殺死細(xì)菌，凝固細(xì)菌蛋白及結(jié)構(gòu)，便于染色；促使細(xì)菌粘附在載玻片上，避免在水洗過(guò)程中被水沖掉；改變細(xì)菌對(duì)染料的通透性，有利于菌細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的染色。通常用火焰加熱固定，將已干燥的涂片在火焰中迅速通過(guò)3次，以手背皮膚接觸玻片不燙為佳。
      3．染色根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康牟煌?，選擇不同的染色方法進(jìn)行染色。染色時(shí)滴加染液，以復(fù)蓋度。
      4．媒染凡能增強(qiáng)染料和被染物的親和力，使染料固定于被染物及能引起細(xì)胞膜通透性改變的物質(zhì)，稱媒染劑。常用的有明礬、鞣酸、金屬鹽和碘等，也有用加熱法促進(jìn)著色。媒染劑可用于初染與復(fù)染之間，也可用于固定之后或含于固定液、染色中。
      ;   5．脫色凡能使已著色的被染物脫去顏色的化學(xué)試劑稱為脫色劑。常用乙醇、丙酮等作為脫色劑。脫色劑可以查出細(xì)菌與染料結(jié)合的穩(wěn)定程度，作為鑒別染色之用。
      6．復(fù)染已脫色處理的細(xì)菌或其結(jié)構(gòu)常以復(fù)染液作復(fù)染以便于觀察。復(fù)染液與初染液的顏色不同而成一鮮明對(duì)比。復(fù)染不宜太強(qiáng)，以免掩蓋初染的顏色。