單分子定位技術(shù)受制于較長的采集和計(jì)算時(shí)間,或者需要特殊的熒光團(tuán)或具有生物毒性的光化學(xué)環(huán)境。在這里,我們提出了一種廣域熒光顯微鏡的統(tǒng)計(jì)超分辨率技術(shù),我們將其稱為多信號分類算法,它具有多個優(yōu)點(diǎn)。它提供了至少50 nm的分辨率,需要更少的幀和更低的激發(fā)功率,甚至在高熒光團(tuán)濃度下也可以工作。
此外,它還可以在記錄的時(shí)間范圍內(nèi)與任何閃爍的熒光團(tuán)一起使用。與單分子定位技術(shù)和四種當(dāng)代統(tǒng)計(jì)超分辨率方法進(jìn)行體外肌動蛋白絲實(shí)驗(yàn)和其他獨(dú)立獲得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)集相比,多信號分類算法顯示出可比或更好的性能。我們還在沒有成像緩沖液的活細(xì)胞微管和活細(xì)胞肌動蛋白絲樣品中以245 ms(使用每秒200幀的速度獲取49幀)的時(shí)間尺度展示了超分辨率。