激光共聚焦顯微鏡是近代很先進的細胞生物醫(yī)學分析儀器之一。它是在熒光顯微鏡成像的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激光熒光探針,利用計算機進行圖像處理,不僅可觀察固定的細胞、組織切片,還可對活細胞的結(jié)構(gòu)、分子、離子進行實時動態(tài)地觀察和檢測。激光共聚焦顯微技術(shù)已用于細胞形態(tài)定位、立體結(jié)構(gòu)重組、動態(tài)變化過程等研究,并提供定量熒光測定、定量圖像分析等實用研究手段,結(jié)合其他相關(guān)生物技術(shù),在形態(tài)學、生理學、免疫學、遺傳學等分子細胞生物學領(lǐng)域得到廣泛應用。下面是常見的3種激光共聚焦顯微鏡樣品處理方法介紹
01、透菌液、泥污、污水類樣品
① 樣品量:5000 rpm離心10 min,可得到綠豆大小沉淀,(1.5 mL離心管)大小的菌體沉淀。
②細菌類需要死活染色/ROS染色的,一般加冰袋泡沫盒4度保存,樣品不和冰袋接觸。
③蛋白/多糖類染色,一般加冰袋泡沫盒4度保存或者2.5%的戊二醛固定4度保存,樣品不和冰袋接觸。
④污泥類樣品可以進行冰切或者刀切。
02、生物膜樣品
①樣品量:金屬/瓷磚/巖石等塊體類建議長寬高尺寸不超過1 cm,薄膜類直徑尺寸不超過2 cm;且均要求樣品表面平整,需要標出拍攝面。
②一般加冰袋泡沫盒4度保存,樣品不和冰袋接觸
③若在爬片上培養(yǎng)生物膜,可將爬片粘于培養(yǎng)皿底部,充滿培養(yǎng)基,封口膜密封完全,再4度保存。
03、植物類樣品
①植物類樣品可進行簡單冰切及刀切,軟化等特殊類請走病理組織切片測試項目
②一般加冰袋泡沫盒4度保存,樣品不和冰袋接觸
③做過的植物類樣品淀粉、胡蘿卜,土豆、葉片、根、莖,擬南芥等